超聲波是一種可控的細胞分裂手段,超聲波的機械效應(yīng)可以更快更全面地滲透到細胞物質(zhì)中,提高物質(zhì)的傳遞。超聲波能使溶劑對植物組織有更大的滲透能力,并能改善傳質(zhì)。超聲空化破壞細胞壁,促進基質(zhì)成分的釋放。在
超聲波粉碎機的強超聲波作用下,細胞或亞細胞中的酶或蛋白質(zhì)會因細胞分裂而釋放出來。細胞分裂是一個敏感的過程,因為細胞壁可以承受體內(nèi)的高滲透壓,必須控制細胞分裂的力度,以避免釋放不需要的物質(zhì),包括細胞碎片和核酸,或變性。那我們在使用時需要注意些什么呢?
1、切勿空載,啟動機器前,超聲波探頭必須插入樣品中。
2、超聲波探頭水深:1.5Cm左右,液面高度30mm以上。探頭應(yīng)該居中,不要貼在墻上。超聲波是垂直縱波,插入過深不易形成對流,會影響粉碎效率。
3、超聲波參數(shù)設(shè)置:設(shè)置超聲波粉碎機的工作參數(shù)。對于對溫度要求敏感的樣品(如細菌),通常在室外使用冰浴。實際溫度必須在25度以下,蛋白質(zhì)核酸肯定不會變性。
?。?)時間:每次超聲波時間不要超過5秒,間隔時間要大于等于超聲波時間,以利于散熱。時間設(shè)置應(yīng)以超聲時間短,超聲次數(shù)多為原則,這樣可以延長超聲機和探頭的壽命。
?。?)超聲波功率:不能太高,以免樣品飛濺或起泡。如果樣品體積小于10ml,功率應(yīng)在200w以內(nèi)。選擇2mm的超聲波探頭,將面板后面的探頭選擇開關(guān)撥到相應(yīng)的檔位。10-200ml樣品體積的功率為200-400w,選擇6mm的超聲波探頭,將面板后面的喇叭打到相應(yīng)的檔位;容量超過200ml的樣品,功率在300-600w之間。選擇一個10mm的超聲波探頭,將面板后面的喇叭打到相應(yīng)的檔位。
?。?)容器選擇:選擇與樣品數(shù)量一樣大的燒杯,也有利于樣品在超聲中的對流,提高粉碎效率。
4、如果樣品放在1.5ml的EP管中,請務(wù)必固定EP管,防止冰浴融化后液面下降,導(dǎo)致無負載。
5、日常維護:超聲波粉碎機使用后,用酒精擦洗探頭或用清水進行超聲。